? ? ? ?上期推送，我們給大家介紹了CD161和LLT1，并且講述了CD161在NK細胞上的調控模式以及腫瘤微環(huán)境的巨大挑戰。本期，我們會(huì )接著(zhù)帶來(lái)CD161成藥性的挑戰以及CD161在T細胞尤其是CD8+的T細胞的病理機制。 一、成藥性的挑戰 ? ? ? ?考慮到以上困難，如果有CD161的研發(fā)管線(xiàn)，就非常值得借鑒，然而（圖9）：  ? 圖9 沒(méi)有公開(kāi)信息表明，以CD161和LLT1為靶點(diǎn)的抗體，含有國際非專(zhuān)用名，并進(jìn)入臨床研究了。 
圖10 沒(méi)有查到CD161抗體相關(guān)專(zhuān)利。但是其作為腫瘤治療靶點(diǎn)，已有若干申請，本圖舉例說(shuō)明。 ? ? ? ?目前，CD161更多的是作為免疫細胞亞群的標記信號，以表征細胞亞群在不同疾病治療中的變化。 ? ? ? ?CD161/LLT1可能存在成藥的困難。分析原因，可能有： ? ? ? ?1. 阻斷結果的矛盾：阻斷對于NK細胞，可以釋放其免疫活性。然而對于T細胞，結果則相反，通過(guò)LLT1的阻斷實(shí)驗發(fā)現，在CD4+ CD8+的T細胞中，激活后的T細胞高表達CD161。不過(guò)，CD161也可能作為負反饋信號，卻缺少LLT1的結合，從而不能實(shí)現抑制。這需要調研相關(guān)病理情況。 ? ? ? ?2. CD161和LLT1的結合能力較弱：KD約48μM，二元復合體的穩定性不強，阻斷活性不易判斷。參考NKG2A/CD94與HLA組成三元復合體，該三元復合體的結構可能更穩定，以進(jìn)行拮抗活性抗體的篩選，是值得參考的。 ? ? ? ?3. 結合表位：LLT1在體內受CLEC2D其他變體的干擾，表位難以選定。但是根據文獻報道，目前已存在的LLT1抗體，可以實(shí)現阻斷LLT1與CD161結合。 ? ? ? ?而CD161的結合表位，與N糖修飾關(guān)聯(lián)可能性較大。如果存在靶向的抗體，N糖修飾的個(gè)體差異，可能導致抗體脫靶。另外，RSCB-PDB數據庫中已有兩者的結構數據，有助于我們預測復合體結合情況，比如https://www.rcsb.org/structure/5MGT（圖11A），https://www.rcsb.org/structure/5MGR（圖11B）?？梢钥吹絅糖修飾在蛋白表位的位置。 A. LLT1胞外域 B. CD161胞外域 圖11 LLT1和CD161胞外域的晶體結構。使用該數據，我們可以模擬兩個(gè)分子的結合。
二、T細胞：向左，自身免疫；向右，腫瘤 ? ? ? ?CD161在T細胞，尤其是CD8+的T細胞的病理機制，也具有巨大的潛力。 ? ? ? ?有研究發(fā)現，北歐的多發(fā)性硬化癥（MS），與CD161在CD8+CD3+ T細胞中的異常過(guò)表達有關(guān)，血液中的CD161顯著(zhù)高于健康人群（圖10）。CD161highCD8+CD3+ T細胞，伴隨高表達的IL-17，IL-12介導增殖，釋放IFN-γ。這些IFN-γ可能導致了MS患者大腦中的免疫損傷，以及異常的B細胞囊泡。 ? ? ? ?之前提到，CD161的表達與IL-17的分泌有很強的相關(guān)性。IL-17作為信息溝通的橋梁，在T細胞調節的獲得性免疫，以及針對細胞外的細菌、真菌的急性炎癥響應，起到重要的作用。IL-17是CD3γδ+的T細胞，或者Th17，或者NKT，產(chǎn)生的效應細胞因子，可激活中性粒細胞，并將其招募到感染和炎癥的部位。IL-17也是調節B細胞效應的細胞因子，在抗病毒方面有積極作用。 ? ? ? ?通常，我們認為MS與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎（RA）類(lèi)似，是一種自身免疫疾病。然而，CD161在其中的表現不同。MS患者中，CD161在CD8+的細胞毒性體細胞中，顯著(zhù)高表達，而RA患者中，CD161在CD8+的細胞毒性體細胞中，顯著(zhù)低表達（圖11）。 ? ? ? ?類(lèi)似的，在克郎氏癥中，也是CD4+的T細胞中，異常高表達CD39和CD161。 圖12 CD161在MS患者中的異常高表達，可被IFN-β治療到低于正常水平。 
圖13 MS和RA中，CD8+或CD4+的T細胞上，CD161的陽(yáng)性率近似（A、C）。然而，在CD8+的T細胞，通常認為是細胞毒性T細胞上，MS中CD161的表達顯著(zhù)更高（B），CD4+的T細胞差異不大（D）。 ? ? ? ?對肝癌組織及患者的血液樣本的研究，發(fā)現對CD8+PD1+的T細胞（具有細胞毒性），CD161+和CD161-的呈現了分布上的顯著(zhù)差異，而這種差異可能與不同的演化線(xiàn)路有關(guān)。CD161+的T細胞，在腫瘤組織的比例低于正常組織，但是CD161-的T細胞降低的比例更高。CD161+的T細胞，具有更強的細胞毒性、增殖能力、腫瘤組織浸潤性（圖14）。 ? ? ? ?這也預示著(zhù)，激活CD161信號通路，而不是阻斷，可能更有利于抗腫瘤的治療。LLT1對CD161親和力不足，需要親和力更高的多肽、抗體。而激活型多肽、抗體的獲得，往往難于阻斷性抗體。 
圖14 CD161+的T細胞，不同于CD161-的T細胞，不依賴(lài)于LAG3-MHCII，具有更強的細胞毒性，增殖能力，以及浸潤腫瘤組織的能力。 
圖15 CD8+CD161+在感染（A）、腫瘤治療（B）、自身免疫（C）相關(guān)的機制。
三、結尾 ? ? ? ?CD161作為NK細胞的靶點(diǎn)，阻斷其與LLT1的結合，可以提高NK的細胞毒性。同時(shí)，CD161對細胞毒性T細胞的活性、記憶分化有正面作用，阻斷CD161反而減弱了免疫活性，不過(guò)，這種阻斷，在治療自身免疫疾病時(shí)，可以起到非常好的效果。因此，選擇CD161/LLT1阻斷型抗體的適應癥，需要考慮其免疫系統的細胞亞群的活性，是否適用于阻斷機制。 ? ? ? ?然而，根據clinictrial的搜索結果，CD161更多的是作為臨床實(shí)驗中，細胞亞群表征的標志物，與CD25、CD69、CD56的應用比較接近。
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